9 февраля, 2016. Эффективность препаратов Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский в профилактике и лечении гриппа












Эффективность препаратов Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский в лечении и профилактике гриппа и острых респираторных вирусных инфекций

О.И.Афанасьева1, Е.В.Эсауленко2
1ФГБУ Научно-исследовательский институт гриппа Минздрава России, Санкт-Петербург;
2ГБОУ ВПО Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет Минздрава России

Начало 2016 г. в нашей стране отмечено растущей (60%) циркуляцией среди взрослого и детского населения вируса пандемического гриппа А(H1N1)pdm09, что к настоящему времени привело к эпидемическому подъему заболеваемости в большинстве регионов [1]. За предшествующий эпидсезон в ряде стран, преимущественно Азиатско-Тихоокеанского региона, отмечены появление и распространение новых опасных подтипов «свиного» и «птичьего» гриппа (H5N1, H5N8, H7N9, H9N2), способных вызывать заболевание с чрезвычайно агрессивным течением [2, 3]. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), ежегодные эпидемии гриппа приводят примерно к 3–5 млн случаев тяжелой болезни и 250–500 тыс. случаев смерти во всем мире. 
На сегодняшний день осуществляется глобальный эпиднадзор за гриппом через международную сеть лабораторий, которая объединяет 128 национальных центров по гриппу в 99 странах мира. По результатам мониторинга гриппа принимаются ответные меры, которые включают профилактические мероприятия, в том числе заблаговременную вакцинацию, а также контроль чувствительности циркулирующих вирусов гриппа к противовирусным препаратам. Хорошо известно, что лекарственная резистентность вирусов ограничивает эффективность лечения гриппа. Имеются данные о случаях безуспешной терапии осельтамивиром у пациентов, инфицированных вирусом A(H1N1)pdm09 в развитых странах [3–5]. Ведущие международные эксперты в опубликованном в 2014 г. Кохрановском обзоре критически оценили эффекты ингибиторов нейраминидазы в лечении и профилактике гриппа и его осложнений [6]. Тем не менее осельтамивир продолжает классифицироваться ВОЗ как основное (жизненно важное) лекарственное средство и входит в стандарты терапии гриппа и у детей (начиная с первого года жизни), и у взрослых. 
В Российской Федерации за последние годы появились и успешно применяются для терапии и профилактики гриппа и других острых респираторно-вирусных инфекций (ОРВИ) инновационные препараты Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский. Эти лекарственные средства разработаны в ООО «Научно-производственная фирма «Материа Медика Холдинг» совместно с ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д.Гольдберга» (г. Томск). Указанные препараты являются представителями нового класса биотехнологических препаратов, за создание которых коллектив авторов был удостоен Премии Правительства Российской Федерации в области науки и техники. Они производятся на основе аффинно очищенных антител к молекулам-регуляторам и медиаторам, вовлеченным в противовирусный иммунный ответ и вирусиндуцированное воспаление. Основным компонентом всех трех препаратов являются технологически обработанные антитела к интерферону g (ИФН-g) – ключевому цитокину противовирусной защиты. В течение многих лет проводился комплекс научно-экспериментальных исследований, в ходе которых установлено, что технологически обработанные (релиз-активные – РА) антитела обладают проантигенным действием, результатом которого является модулирование активности молекул-мишеней и связанных с ними биологических эффектов. Методом спектроскопии ядерно-магнитного резонанса высокого разрешения, позволяющим определять меченный изотопом 15N ИФН-g, показано, что РА антитела к ИФН-g оказывают аллостерический эффект на структуру молекулы ИФН-g: происходят изменения на поверхности димерной формы ИФН-g, смещается равновесие между мономерным и димерным формами ИФН-g (переход из неактивной в активную форму белка) [7, 8]. В результате данной конформации димер ИФН-g становится более реактивным, что проявляется в повышении его противовирусной активности и эффективности связывания молекул ИФН-g со своими рецепторами, а также увеличении экспрессии рецепторов ИФН-g на поверхности клеток-мишеней [9]. 
В серии доклинических исследований in vivo и in vitro показана высокая противовирусная активность РА антител к ИФН-g в отношении различных штаммов вирусов гриппа А: H1N1(A/California/04/09); H1N1(A/California/07/09); H1N1pdm09sen (A/Danemark/524/09sen); H1N1pdm09res (A/Danemark/528/09res); H3N8 (A/Equi2/Miami/1/63); H3N2 (A/Aichi/2/68). Данные исследования проведены в ведущих российских и зарубежных научно-исследовательских организациях: ФГБУ «НИИ гриппа» (г. Санкт-Петербург, Россия), ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» (п. Кольцово, Россия), Институт Пастера (г. Париж, Франция), компании Apcis (г. Мезон-Альфорт, Франция), Cerep (г. Париж, Франция) и Euroscreen S.A. (г. Госсели, Бельгия), университеты Питтсбурга (г. Питтсбург, США) и штата Юта (г. Логан, США). 
На экспериментальных моделях пандемического гриппа (А(H1N1) A/California/04/2009; США, 2009; А(H1N1) A/California/07/09; Россия, 2009; Франция, 2010) установлено, что РА антитела к ИФН-g не менее эффективно, чем препарат сравнения осельтамивир, уменьшают титр вируса гриппа в легочной ткани, снижают тяжесть поражения легких и смертность зараженных животных. Сочетанное применение двух препаратов приводит к усилению защитного эффекта: при дозе инфицирования 1 ЛД50 выживаемость животных повышается до 95% (против 90% на фоне монотерапии осельтамивиром); при дозе инфицирования 10 ЛД50 – до 50% (против 10% соответственно) [10]. 
На культуре клеток MDCK, зараженных различными штаммами вируса гриппа А (Франция, 2015), показано, что РА антитела к ИФН-g статистически значимо снижают количество копий вируса пандемического гриппа A H1N1 (A/St Petersbourg/100/11), а в комбинации с осельтамивиром – проявляют противовирусную активность как в отношении чувствительного (A/Danemark/524/09 sen), так и резистентного (A/Danemark/528/09 res) к осельтамивиру штамма гриппа H1N1pdm09. Был показан аддитивный характер совместного применения двух препаратов, позволяющий усиливать противовирусную активность каждого. 
Терапевтическая эффективность препаратов на основе РА антител к ИФН-g подтверждена результатами рандомизированных контролируемых исследований (РКИ), проведенных в соответствии с принципами доказательной медицины. К настоящему времени завершено 4 РКИ препарата Эргоферон с участием 1168 пациентов. Все РКИ зарегистрированы в реестре ClinicalTrials.gov. В течение четырех эпидсезонов (2010–2014 гг.) в 12 медицинских центрах РФ проводилось многоцентровое сравнительное (с осельтамивиром) РКИ эффективности и безопасности Эргоферона в лечении сезонного гриппа А и В, диагноз которого подтверждался экспресс-методом. Эпидемический профиль этого периода характеризовался начальным доминированием вирусов гриппа типа A(H3N2) и типа B с последующим преобладанием в конце зимы − начале весны различных субтипов вируса гриппа типа A(H1N1). Главный вывод исследования: терапевтическая эффективность препарата Эргоферон сопоставима с действием осельтамивира (ТамифлюR). Выраженность и длительность лихорадки – основного клинического маркера виремии и активности инфекционно-воспалительного процесса – на фоне лечения Эргофероном не отличались от результатов терапии осельтамивиром. Действие Эргоферона начиналось быстро. Средняя продолжительность лихорадочного периода у пациентов составила около 2 дней. Параллельно с лихорадкой отмечался быстрый и выраженный терапевтический эффект препарата Эргоферон в отношении наиболее значимых при гриппе симптомов интоксикации – головной и других видов боли (мышечной, суставной), астенических и нейровегетативных расстройств (слабость, недомогание, диссомния). Тяжесть интоксикационного синдрома на 3-й день лечения снижалась вдвое. Пятидневный курс терапии Эргофероном показал сопоставимый с осельтамивиром эффект как по отдельным симптомам, так и по совокупности клинических проявлений гриппа, сроки купирования которых в среднем составили менее 3 дней. Процент «полных реконвалесцентов» к окончанию курса лечения был достоверно сопоставим в двух группах. Результаты данного РКИ представлялись на конгрессе Европейского респираторного общества в Барселоне и опубликованы на сайте ClinicalTrials.gov. 
Итоги трех других двойных слепых плацебо-контролируемых исследований у детей и взрослых с ОРВИ показали, что применение препарата Эргоферон по терапевтической схеме приводит к более быстрому, по сравнению с плацебо-терапией, выздоровлению пациентов, а также снижению тяжести течения вирусной инфекции. Следует отметить, что компания-разработчик специально для детей создала жидкую форму препарата (раствор для приема внутрь), которая хорошо переносится пациентами и помогает выздоравливать в более короткие сроки, снижая тяжесть течения инфекции, особенно на ранних, наиболее тяжелых этапах болезни. В условиях двойного слепого плацебо-контроля доказано, что уже на второе утро приема Эргоферона 1/4 пациентов имели температуру тела 37,0°С и ниже, а 43% детей – 37,2°С и ниже. Средняя продолжительность лихорадочного периода на фоне применения Эргоферона составила 1,9±0,8 дня. Не было зарегистрировано случаев развития бактериальных осложнений или ухудшения течения заболевания, а также обострений сопутствующей аллергической и хронической ЛОР-патологии. 
Проведенные РКИ в детской и взрослой популяциях показали, что препарат Эргоферон характеризуется высоким уровнем безопасности: не оказывает влияния на витальные функции и не приводит к развитию серьезных нежелательных явлений. Не было получено данных о взаимодействии Эргоферона с лекарственными средствами, применявшимися в качестве сопутствующей терапии, включая нестероидные противовоспалительные препараты, ингаляционные кортикостероиды, препараты кромоглициевой кислоты, антагонисты лейкотриеновых рецепторов, b2-агонисты, антигипертензивные препараты, диуретики, статины и др. 
Препараты Анаферон и Анаферон детский успешно используются для терапии гриппа и ОРВИ, начиная с 2001 г. Несмотря на достаточно длительный опыт практического применения и большое число РКИ, исследования по препаратам продолжаются. Так, в настоящее время проходит международное многоцентровое (в 34 медицинских центрах) двойное слепое плацебо-контролируемое исследование, целью которого является получение современных данных об эффективности препарата Анаферон детский в терапии гриппа. Для оценки противовирусной активности препарата проводится оценка изменения вирусной нагрузки (в назофарингеальных образцах) на фоне терапии методом RT-PCR in real-time. Промежуточный анализ по итогам двух эпидсезонов демонстрирует преимущества препарата над плацебо-терапией, которое заключается в значимом снижении вирусной нагрузки уже после 2 дней лечения. 
В ФГБУ «НИИ детских инфекций» ФМБА России в рамках научно-исследовательской работы в течение 2012–2013 гг. изучалась и сравнивалась с осельтамивиром противовирусная и терапевтическая эффективность Анаферона детского у 102 пациентов (результаты представлены в 2013 г. на Европейском конгрессе клинических микробиологов и инфекционистов в Берлине). Методом real-time RT-PCR выявлено, что у 75% больных был грипп А, у 25% – грипп В. На фоне 5-дневного курса терапии отмечена сопоставимая клиническая и противовирусная эффективность двух препаратов, что проявлялось в сходной динамике снижения вирусовыделения из верхних дыхательных путей и позитивных изменениях симптоматики. Действие Анаферона детского, в отличие от осельтамивира, ассоциировалось с существенным повышением уровня ИФН-g и ИФН-a в разгар инфекционно-воспалительного процесса и последующим восстановлением концентрации цитокинов в периоде реконвалесценции. 
Препарат Анаферон детский выпускается в твердой (таблетки) и жидкой (капли для приема внутрь) формах и разрешен к применению, начиная с 1-го месяца жизни. 
В связи с высокой безопасностью Анаферон и Анаферон детский могут длительно (до 3 мес) и эффективно использоваться в качестве средства профилактики гриппа и ОРВИ. Клинико-эпидемиологические исследования, проведенные среди разных категорий населения ведущими научно-исследовательскими центрами РФ (ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве»; ФГБУ «НИИ гриппа» и др.), показали, что протективная эффективность Анаферона достигает 90% [11, 12]. Значимое снижение заболеваемости гриппом/ОРВИ на фоне 3-месячных курсов терапии в течение сезонного подъема заболеваемости отмечено среди лиц трудоспособного и пожилого возраста, лиц, относящихся к группам риска (медицинских работников, работников промышленных предприятий, подвергшихся воздействию неблагоприятных производственных факторов, пациентов с хроническими сердечно-сосудистыми, бронхолегочными заболеваниями, больных разными формами туберкулеза, ВИЧ-инфицированных). 
Таким образом, на сегодняшний день в арсенале врачей для лечения и профилактики гриппа и ОРВИ имеются не только зарубежные, но и отечественные препараты с доказанной эффективностью. Среди них – Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский российской компании «Материа Медика». Приведенные данные свидетельствуют о том, что, регулируя функциональную активность эндогенных молекул и рецепторов, участвующих в каскаде клеточного противовирусного ответа, препараты воздействуют на естественные процессы противовирусной защиты, снижают интенсивность вирусиндуцированного воспаления и ускоряют клинико-вирусологическое выздоровление больного. В отличие от других, не менее эффективных противовирусных средств, препараты не оказывают негативного (стимулирующего) влияния на иммунную систему, что особо значимо в раннем периоде становления иммунитета у детей первых лет жизни. Терапевтическая и противовирусная эффективность сочетается с хорошим профилем безопасности, что позволяет назначать препараты пациентам разного возраста без риска развития осложнений от проводимой терапии. 

Литературы
     1. http://www.rospotrebnadzor.ru/deyatelnost/epidemiological-surveillance/
     2. World Health Organization. Influenza update, 15 June 2015. http://www.who.int/influenza/surveillance_monitoring/updates/latest_update_GIP_surveillance/en/
     3. Influenza Activity − United States, 2014–15 Season and Composition of the 2015–16 Influenza Vaccine. Morbidity and Mortality Weekly Report (MMWR). http://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm6421a5.htm
     4. Calatayud L, Lackenby A, Reynolds A et al. Oseltamivir-Resistant Pandemic (H1N1) 2009 Virus Infection in England and Scotland, 2009–2010. Emerging Infectious Diseases, 2011; 17 (10): 1807−15.
     5. Storms AD, Gubareva LV, Su Su et al. Oseltamivir-Resistant Pandemic (H1N1)2009 Virus Infections, United States, 2010–11. Emerging Infectious Diseases, 18 (2): February 2012. DOI: http://dx.doi.org/10.3201/eid1802.111466
     6. Jefferson T, Jones M, Doshi P et al. Neuraminidase inhibitors for preventing and treating influenza in healthy adults: a Cochrane review. Cochrane Database Syst Rev, 2014; Apr 10; 4: CD008965.
     7. Эпштейн О.И. Релиз-активность от феномена до создания новых лекарственных средств. Бюл. экспериментальной биологии и медицины. 2012; 154: 62–7.
     8. Эпштейн О.И. Феномен релиз-активности и гипотеза «пространственного» гомеостаза. Успехи физиологических наук. 2013; 44: 54–76.
     9. Тарасов С.А., Качанова М.В., Горбунов Е.А. и др. Анаферон – эффективное средство для лечения и профилактики широкого спектра инфекционных заболеваний. Вестн. Международной академии наук (русская секция). 2010; с. 23–7.
     10. Tarasov SA, Zarubaev VV, Gorbunov EA et al. Activity of ultra-low doses of antibodies to gamma-interferon against lethal influenza A(H1N1)2009 virus infection in mice. Antiviral Res 2012; 93: 219–24.
     11. Ахмадуллина Р.Р. Особенности эпидемического процесса гриппа и гриппоподобных заболеваний (на модели Московской области). Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2006.
     12. Каира А.Н., Ющенко Г.В., Ахмадуллина Р.Р., Черкасова Н.А. Неспецифическая профилактика гриппа и острых респираторных вирусных инфекций препаратом Анаферон на территории Московской области. Инфекционные болезни. 2005; 3 (3): 64–7.





Доклинические исследования противогриппозной активности препаратов Анаферон детский и Эргоферон

Л.Н.Шишкина
ФБУН Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Из множества вирусов, вызывающих инфекционные заболевания верхних дыхательных путей, самым распространенным является вирус гриппа А. Ежегодно в мире регистрируется от 3 до 5 млн случаев заболевания гриппом, из которых 250–500 тыс. оказываются смертельными [1]. Болезнь часто сопровождается тяжелым течением и вызывает серьезные осложнения, которые могут привести к госпитализации и летальному исходу, особенно у пациентов, находящихся в группе риска (дети, взрослые старше 60 лет, пациенты с хроническими заболеваниями сердечно-сосудистой, легочной систем, сахарным диабетом, курильщики). Особое внимание необходимо уделять профилактике заболеваемости гриппом там, где традиционно происходят большие скопления людей, – в замкнутых пространствах (общественный транспорт, учреждения культурно-развлекательной направленности, организованные коллективы детей и взрослых: школьники и студенты, военнослужащие, работающие люди). 
Антигенная структура вируса гриппа А способна к постоянной изменчивости, поэтому данный возбудитель может обходить защитные механизмы иммунитета [2]. При этом существующие в настоящее время препараты для лечения гриппа имеют ряд ограничений, связанных с их применением, что делает актуальным поиск новых эффективных средств для лечения гриппа [3]. Одним из таких препаратов является Анаферон детский, созданный на основе релиз-активных антител к интерферону g и являющийся безопасным и эффективным для терапии многих инфекционных заболеваний [4–6]. Другим изученным препаратом в рамках исследования противогриппозной активности является препарат II поколения Эргоферон, в состав которого помимо релиз-активных антител к интерферону g вошли релиз-активные антитела к CD4 и гистамину. 
В Государственном научном центре вирусологии и биотехнологии «Вектор» в течение многих лет проводились исследования по изучению противовирусной активности Анаферона детского и Эргоферона на разных экспериментальных моделях гриппа с различной выраженностью инфекции и оценкой влияния на разнообразные параметры. В экспериментах использовали штаммы вируса гриппа A/Aichi/2/68 (H3N2), A/California/07/2009 (H1N1) на мышах Balb/c и штамм A/Chicken/Suzdalka/Nov-11/2005 (H5N1) на курах [7–9]. Для интраназального инфицирования животных использовали дозы вируса гриппа, вызывающие 50 или 90% смертность. Мышам в экспериментах по изучению противовирусной активности Анаферона детского 1–2 раза в сутки перорально вводили по 0,2 мл препарата, куры получали его в свободном доступе. Эргоферон мыши получали перорально, суммарно по 0,4 мл на мышь в сутки. Препараты исследовали в следующих режимах: Анаферон детский – в профилактическом (ежедневно за 5 сут до заражения), лечебно-профилактическом (ежедневно за 2–5 сут до и в течение 8–16 сут после инфицирования) и лечебном (в течение 5 сут после инфицирования); Эргоферон – в лечебно-профилактическом режиме (ежедневно за 5 сут до и в течение 16 сут после заражения вирусом). Животным в контрольных группах вводили растворитель, используемый для приготовления препаратов. В качестве препарата сравнения во всех исследованиях использовали действующее вещество препарата ТамифлюR (осельтамивир). Противовирусную эффективность препаратов оценивали по снижению титра вируса в легких, увеличению выживаемости и средней продолжительности жизни инфицированных животных. 
Результаты серии проведенных исследований продемонстрировали высокую эффективность Анаферона детского и Эргоферона в условиях экспериментальных моделей в отношении различных штаммов вируса гриппа. 
Так, уже через 4 сут после заражения животных Анаферон детский достоверно снижал продукцию вируса в легких опытной группы. Например, титр вируса А/California/07/2009 (H1N1) в респираторном тракте инфицированных мышей снижался более чем в 10 раз по сравнению с контролем (см. таблицу) [7]. 

ergoferon-tabl.jpg

Анаферон детский также достоверно повышал количество выживших животных и их среднюю продолжительность жизни на 28 и 35% соответственно по сравнению с аналогичными показателями в группе слепого контроля [8]. 
Эргоферон в свою очередь статистически значимо (p<0,05) подавлял репликацию вируса в легких животных более чем в 10 раз, как через 2, так и через 4 сут по сравнению с контрольной группой. Кроме того, применение Эргоферона приводило к снижению смертности животных в 2 раза, а также к достоверному увеличению средней продолжительности жизни на 40% по сравнению с группой слепого контроля (p<0,05). 
Противовирусное действие препаратов Анаферон детский и Эргоферон было сравнимо с препаратом положительного контроля осельтамивиром в его тестируемой дозе. При этом Эргоферон в рамках изученной экспериментальной модели обладал более высокой противовирусной активностью, чем его однокомпонентный предшественник Анаферон детский, что выражалось в увеличении выживаемости животных с 42,5 до 60% при одинаковой средней продолжительности жизни, составляющей около 12 сут [10]. 
Таким образом, в результате доклинических исследований препаратов Анаферон детский и Эргоферон было показано, что оба препарата ингибируют репликацию различных штаммов вируса гриппа в легких лабораторных мышей, тем самым предотвращая развитие основных симптомов заболевания и снижая смертность, связанную в первую очередь с легочной пневмонией.

Литература
     1. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs211/en/
     2. Viboud C, Grais RF et al. Multinational impact of the 1968 Hong Kong influenza pandemic: evidence for a smoldering pandemic. J Inf Dis 2005; 192: 233–48.
     3. Bowman M, Forgie SE. During influenza season, which children need an antiviral and which should I prescribe? Do I need to verify that they have influenza first?// Paediatr Child Health Vol 2010; 15 (8): 499–501.
    4. Каира А.Н., Соломай Т.В., Королькова Е.А. Применение препарата «Анаферон» для профилактики острых респираторных заболеваний. Актуальные вопросы эпидемиологии и профилактики инфекционных болезней – 2014. Санитарный врач. 2014; 7: 54–8.
    5. Волков И.К., Геппе Н.А. Применение релиз-активных препаратов на основе антител к интерферону-гамма в лечении и профилактике респираторных инфекций у детей. Трудный пациент 2014; 12 (5): 10–6.
    6. Тарасов С.А., Качанова М.В. и др. Анаферон – эффективное средство для лечения и профилактики широкого спектра инфекционных заболеваний. Вестн. Международной академии наук (русская секция). 2010; 1: 23–7.
    7. Шишкина Л.Н., Скарнович М.О. и др. Противовирусная активность Анаферона детского у мышей, зараженных пандемическим вирусом гриппа А (H1N1/09). Бюл. экспериментальной биологии и медицины. 2010; 149 (5): 546–8.
    8. Шишкина Л.Н., Сергеев А.Н. и др. Противовирусная активность Анаферона детского при экспериментальном инфицировании мышей вирусом гриппа. Физиология и патология иммунной системы. 2008; 1: 10–4.
   9. Шишкина Л.Н., Сергеев А.Н. и др. Изучение лечебно-профилактического действия сверхмалых доз антител к гамма-интерферону при инфицировании кур вирусом гриппа птиц. Сборник материалов XV российского национального конгресса «Человек и лекарство». 2008: с. 732.
   10. Шишкина Л.Н., Сергеев А.Н и др. Изучение эффективности лечебно-профилактического действия Анаферона детского при гриппозной инфекции у мышей. Бюл. экспериментальной биологии и медицины. 2008; 146 (6): 763–5.





Противовирусная терапия гриппа и других ОРВИ

И.П.Шиловский, М.Р.Хаитов
ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России, Москва

Острые респираторно-вирусные инфекции (ОРВИ) – самый распространенный тип инфекционной патологии. На сегодняшний день идентифицировано более 200 разновидностей возбудителей ОРВИ (риновирусы, респираторно-синцитиальный вирус – РСВ, аденовирусы и др.), которые способны вызывать широкий спектр поражений как верхних, так и нижних дыхательных путей – от легкого ринита до тяжелых бронхитов, бронхиолитов и пневмоний. Одним из наиболее опасных и актуальных возбудителей ОРВИ на сегодняшний день является вирус гриппа. Гриппозная инфекция может вызывать тяжелые осложнения и приводить к летальному исходу, особенно среди пожилых людей, беременных женщин, детей раннего возраста и пациентов, страдающих различными формами иммунодефицитных состояний [1]. К одной из разновидностей гриппа, для которых свойственно тяжелое течение, относится так называемый «свиной» грипп, вызываемый высокопатогенными штаммами вируса гриппа А/H1N1(2009) и характеризующийся быстрым развитием осложнений, в первую очередь вирусной пневмонии. В отличие от сезонного гриппа, «свиной» грипп поражает преимущественно людей молодого возраста (до 35 лет). 
В соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения [2] препаратом выбора для лечения гриппа А/H1N1(2009) является осельтамивир (коммерческое название – ТамифлюR), ингибирующий нейраминидазу – поверхностный гликопротеин вируса гриппа, фермент, участвующий в различных этапах репликации вируса (проникновение, выход вирионов из инфицированной клетки). Однако, по данным производителя [3], у осельтамивира есть некоторые ограничения, связанные с необходимостью начала терапии как можно в более ранние сроки после появления симптомов (не позже 48 ч). Кроме того, осельтамивир обладает доказанной эффективностью только в отношении вирусов гриппа А и В, что лимитирует его применение при микстинфекциях. Также использование препарата ограничивают наличие резистентных к осельтамивиру штаммов вируса гриппа и нежелательные явления, наиболее частые из которых – тошнота и рвота. 
В связи с этим актуально совместное применению ТамифлюR с другими противовирусными лекарственными средствами, так как комбинированная терапия благодаря использованию препаратов с различным механизмом действия более эффективна в случае резистентности к одному из них. При гриппе актуальна комбинация препаратов, ингибирующих ключевые функциональные белки вируса гриппа А, с препаратами, воздействующими на выраженность противовирусного иммунного ответа. Одна из универсальных противовирусных систем, реализующих ответ на вирусную инфекцию в кратчайшие сроки, – система интерферонов (ИФН). Именно поэтому наиболее перспективные препараты для комбинированной терапии гриппа – лекарственные средства, улучшающие способность ИФН взаимодействовать со своими рецепторами и тем самым ускоряющие синтез эндогенных противовирусных белков. Поскольку препараты с подобным механизмом действия не истощают иммунную систему, влияя на эффективность эндогенных ИФН, данный подход позволяет достичь высокой эффективности, с одной стороны, а с другой – сократить нежелательные явления, связанные с применением индукторов ИФН. Кроме того, данные препараты можно применять в профилактических целях. 
К этой группе относятся Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский, содержащие в качестве одного из активных фармацевтических компонентов антитела к ИФН-g в специальной релиз-активной форме, разработанные на базе ФГБНУ «Научно-исследовательский институт фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д.Гольдберга» (г. Томск). 
Ключевой механизм действия данных препаратов – влияние на систему ИФН, в частности на ИФН-g, и функционально сопряженных с ней цитокинов, приводящее к нормализации функциональной активности естественных факторов иммунной защиты и усилению противовирусного действия [4]. С помощью спектроскопии ядерно-магнитного резонанса было показано, что Анаферон детский вызывает конформационные изменения молекул ИФН-g [5], влияя на эффективность лиганд-рецепторного взаимодействия (т.е. взаимодействие ИФН-g со своим рецептором) и увеличивая экспрессию рецепторов ИФН-g на поверхности клеток-мишеней [6]. 
В рамках доклинических исследований данных препаратов проведены обширные исследования противогриппозной активности в отношении различных штаммов вируса гриппа А с привлечением международных специалистов из США и Европы. В частности, показана эффективность применения данных препаратов как отдельно, так и в комбинации с осельтамивиром в лечении «свиного» гриппа, вызываемого высокопатогенными штаммами вируса гриппа A/California/04/09 и A/California/07/09. 
Эффективность в отношении гриппа A/California/04/2009 изучали в Utah State University (США) на модели in vivo. Мышам-самкам линии BALB/c (18–20 г) (n=30 в каждой группе) перорально вводили Анаферон детский в течение 5 дней до вирусного заражения и на протяжении 21 дня после вирусного заражения. Мыши из группы сравнения получали контроль (растворитель Анаферона детского) перорально в течение 5 дней до заражения, далее в течение 5 дней после заражения – осельтамивир (25 мг/кг в день) и на протяжении 16 дней после лечения осельтамивиром – снова контроль. Мыши третьей группы получали комбинацию Анаферона детского и осельтамивира по описанной схеме. Группа контроля получала растворитель Анаферона детского в том же режиме, что и животные других групп, получавших препараты. Все животные имели свободный доступ к питьевой воде. Мышам вводили наркоз в виде внутрибрюшинной инъекции кетамина, после чего интраназально инфицировали 3 ЛД50 клеточной культуры (CCID50) вируса гриппа A/California/04/2009 (H1N1) на мышь. В результате эксперимента было показано, что Анаферон детский повышал выживаемость мышей на 25% (по сравнению с контрольной группой) и с такой же эффективностью, как и осельтамивир, сокращал титр вируса гриппа в легких мышей. Совместное применение Анаферона детского и осельтамивира увеличивало выживаемость мышей по сравнению с монотерапией осельтамивиром, а также приводило к достоверному (p<0,05) снижению титра вируса гриппа на 6-й день после инфицирования по сравнению с монотерапией осельтамивиром [7]. 
Заслуживает внимания исследование in vivo, проведенное в компании APcis S.A. (Франция), в котором противовирусная активность препарата и его комбинация с осельтамивиром были изучены в отношении другого штамма «свиного» гриппа –A/California/07/09 (H1N1). Схема введения препаратов аналогична уже описанной с той лишь разницей, что доза осельтамивира была 10 мг/кг в день. Показано, что Анаферон детский обладает противовирусной активностью, сопоставимой с действием осельтамивира. Комбинированное введение указанных препаратов приводило к улучшению общего состояния животных по сравнению с данным показателем у мышей, получавших только осельтамивир (более позднее начало инфекции, снижение ее выраженности). Кроме того, суммарные оценки состояния легких, отмеченные по результатам макроскопического исследования, свидетельствуют о более низкой степени их поражения у животных, получавших исследуемые препараты, по сравнению с группой инфицированных мышей, которым препараты не вводили [7]. 
Позже было проведено еще одно исследование, результаты которого опубликованы в авторитетном специализированном научном рецензируемом журнале «Antiviral Research», издаваемом Международным обществом по противовирусным исследованиям [8]. В работе показано, что Анаферон детский значительно сокращал смертность мышей линии Balb/c, инфицированных летальной дозой пандемического штамма вируса гриппа А/H1N1 (A/California/07/2009). При этом защитная активность Анаферона детского не уступала эффективности препарата сравнения осельтамивира (20 мг/кг в сутки). Более того, сочетание Анаферона детского с осельтамивиром (20 мг/кг в сутки) приводило к более выраженному противовирусному эффекту по сравнению с наблюдаемым при монотерапии осельтамивиром: выживаемость экспериментальных животных увеличивалась в 5 раз. Защитное действие самого Анаферона детского проявлялось в виде достоверного (p<0,05), по сравнению с контролем, увеличения продолжительности жизни зараженных животных, снижения титра вируса в легочной ткани, снижения смертности у животных и нормализации структуры легочной ткани (средний размер очага пневмонии был в 2 раза меньше, чем в контрольной группе). 
В рамках недавно завершившегося исследования, проведенного в Институте Пастера во Франции, оценивали противовирусную активность препарата Анаферон детский в комбинации с осельтамивиром на клетках, зараженных различными штаммами вируса гриппа А. Методом полимеразной цепной реакции оценивали количество копий вируса. Анаферон детский статистически значимо снижал количество копий вируса пандемического гриппа A H1N1 (A/St Petersbourg/100/11) в зараженной культуре клеток. Более того, было показано, что в комбинации с осельтамивиром Анаферон детский обладает противовирусной активностью как в отношении чувствительного к осельтамивиру штамма гриппа H1N1pdm09sen (A/Danemark/524/09sen), так и в отношении резистентного H1N1pdm09res (A/Danemark/528/09res). При этом осельтамивир без добавления Анаферона детского, как и ожидалось, оказался эффективен в отношении только чувствительного штамма гриппа и не эффективен в отношении резистентного [9]. 
С целью изучения механизма действия Анаферона детского, а именно для оценки способности препарата ингибировать нейроминидазу, противовирусный эффект Анаферона детского в комбинации с осельтамивиром изучали с использованием флуометрического теста (Munana). Показано, что Анаферон детский никак не влияет на нейроминидазную активность вируса, что позволяет использовать его в комбинации с осельтамивиром для повышения эффективности терапии последним [9]. 
Результаты, полученные для комбинации Анаферона детского и осельтамивира, свидетельствуют об аддитивном характере действия препаратов: повышение эффективности осельтамивира в присутствии Анаферона детского наблюдалось для всех протестированных штаммов, кроме того, Анаферон детский никак не влияет на активность нейроминидазы, подтверждая, что механизм действия препарата отличен от такового осельтамивира. 
Эффективность другого представителя данного класса лекарственных средств – Эргоферона оценивали в ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России в отношении РСВ – наиболее частой причины бронхитов, бронхиолитов и пневмоний у новорожденных детей. Ежегодно в мире регистрируется до 1 млн смертельных исходов РСВ-инфекции. Большинство существующих препаратов против РСВ недостаточно эффективны, дороги и зачастую имеют риск развития осложнений при их применении. Нами показано, что предварительная инкубация препарата с вирусным материалом приводит к снижению его инфицирующей способности. Предположительно, эффект препарата реализуется через воздействие на вирусные белки RSV-G и RSV-F, которые необходимы для проникновения вириона в клетки-мишени. В рамках изучения противовирусной активности препарата Эргоферон исследована его эффективность в отношении РСВ на клетках линии HeLa in vitro. Противовирусную активность оценивали методом RT-PCR и титрованием на монослое клеток MDKB. Данные, полученные в ходе исследования, показывают, что Эргоферон статистически значимо снижает вирусную нагрузку в исследованной культуре клеток [10–12]. 
Таким образом, в проведенных в России и за рубежом доклинических исследованиях была показана эффективность комбинированного применения релиз-активных антител к ИФН-g человека (активный фармацевтический ингредиент, входящий в состав препаратов Эргоферон, Анаферон и Анаферон детский) при гриппе, включая высокопатогенный штамм А/H1N1(2009), а также других ОРВИ. 

Литература
     1 Факты и статистика. Всемирная организация здравоохранения, 2016; http://www.euro.who.int/ru/health-topics/communicable-diseases/influenza/data-and-statistics.
     2 Organization WH. WHO Guidelines for Pharmacological Management of Pandemic Influenza A(H1N1) 2009 and other Influenza Viruses, 2010; http://www.who.int/csr/resources/publications/swineflu/h1n1_guidelines_pharmaceutical_mngt.pdf.
     3 Inc G. TAMIFLU (oseltamivir phosphate) – Prescribing Information, 2014; http://www.gene.com/download/pdf/tamiflu_prescribing.pdf.
     4 Жавберт Е.С., Дугина Ю.Л., Эпштейн О.И. Иммунотропные свойства анаферона и анаферона детского. Антибиотики и химиотерапия. 2013; 58 (5–6): 17–23.
     5 Эпштейн О.И. Феномен релиз-активности и гипотеза «пространственного» гомеостаза. Успехи физиологических наук. 2013; 44 (3): 54–76.
     6 Тарасов С.А., Качанова М.В., Горбунов Е.А. и др. Анаферон – эффективное средство для лечения и профилактики широкого спектра инфекционных заболеваний. Вестн. Международной академии наук (русская секция). 2010 (1): 23–7.
     7 Tarasov S, Zarubaev V, Tafani J et al. Antibodies to interferon-gamma in ultra-low doses: a new option rof pandemic influenza. 20th European Congress of Clinical Microbiology and Infectious Disease. 2010.
     8 Tarasov SA, Zarubaev VV, Gorbunov EA et al. Activity of ultra-low doses of antibodies to gamma-interferon against lethal influenza A(H1N1)2009 virus infection in mice. Antiviral Res 2012; 93: 219–224.
     9 Пресс-релиз компании APcis. Лаборатория гриппа Института Пастера и компания APcis провели совместное исследование с компанией Материа Медика Холдинг. Опубликовано 27.01.2016: http://www.ap6.fr/2016/01/27/news-from-the-cold-pasteur-institute-flu-laboratory-and-apcis-make-collaborative-research-with-materia-medica-holding
    10 Шиловский И.П., Прозорова М.С., Хаитов М.Р. Способность препарата эргоферон подавлять инфицирующую активность респираторно-синцитиального вируса in vitro. Иммунология. 2015 (4): 216–9.
    11 Шиловский И.П., Корнилаева Г.В., Хаитов М.Р. Новые возможности в терапии респираторно-синцитиальной вирусной инфекции: данные доклинического исследования препарата «Эргоферон». Иммунология. 2012; 33 (3): 144–8.
    12 Shilovskiy I, Shershakova N, Prozorova M et al. RSV-specific antiviral activity of release-active polyclonal antibodies to interferon gamma, CD4 receptor and histamine in vitro. Allergy 2015; 70 (S101): 403.


Поделиться ссылкой на выделенное