Клинический разбор в акушерстве, гинекологии и репродуктологии №02 2021

Role of chlamydial infection in the pathogenesis of tubal factor infertility

Svetlana O. Dubrovina, Oksana A. Ardintseva
Rostov State Medical University, Rostov, Russia
s.dubrovina@gmail.com

Abstract
Background. The prognostic serum level of antibodies to Chlamydia trachomatis in preoperative pathology of the fallopian tubes remains controversial. The aim of this study is to correlate antibodies to C. trachomatis in blood serum with the expression of the adhesions and pathology of the fallopian tubes in infertile patients with tuboperitoneal factor of infertility diagnosed by laparoscopy.
Material and methods. The study involved 93 patients of reproductive age with a history of primary infertility. The patients were stratified into 2 groups according to the presence of a definable factor of infertility. 1A subgroup consisted of 32 women with infertility of tubal genesis and pathology of the fallopian tubes; 1B Subgroup – 25 women with tubal infertility and normal fallopian tubes. The control group consisted of 35 patients with infertility of unspecified genesis without pathology of the fallopian tubes and no history of any previous STIs (sexually transmitted infections). Serum concentrations were determined by enzyme-linked immunosorbent assay for the presence of IgG to MOMP and IgG to HSP60 C. trachomatis (test systems of ZAO “Vector-Best”, Russia, automatic analyzers TecAn, Austria, and mini VIDAS, BIOMERIEUX, France). The results were carried out using the Statistica 12.5 software package.
Results. In the 1A and 1B subgroup of patients with previous chlamydial infection, the levels of IgG to HSP60 C. trachomatis and IgG to MOMP C. trachomatis exceeded those of the control group (p<0.05). In patients IA subgroups IgG to HSP60 C. trachomatis was found in 23 (71.9%), IgG to MOMP C. trachomatis – in 29 (90.6%) respectively. In the subgroup 1B of patients IgG to HSP60 C. trachomatis was found in 10 (40%), IgG to MOMP C. trachomatis – in 24 (96%) women. In the control group 2 (5.6%) of 36 patients were found to have IgG to C. trachomatis MOMP ith the absence of IgG HSP60 to C. trachomatis.
Conclusion. Serological testing of C. trachomatis HSP60 IgG is a more specific marker compared to C. trachomatis MOMP IgG for predicting chlamydial infection-associated tubal infertility. Using this test can help to predict tubal-peritoneal infertility.
Key words: infertility, chlamydial infection, IgG to MOMP, IgG to HSP60.
For citation: Dubrovina S.O., Ardintseva O.A. Role of chlamydial infection in the pathogenesis of tubal factor infertility. Clinical case discussion in obstetrics, gynecology and reproductive medicine. 2021; 2: 15–19. DOI: 10.47407/kragr2021.1.2.00011


Введение
Хламидийная инфекция является наиболее часто диагностируемой бактериальной инфекцией, передаваемой половым путем (ИППП) [1], ежегодно регистрируется около 127 млн новых случаев инфицирования [2]. Среди молодых женщин примерно у 70–80% инфекция протекает бессимптомно, что повышает их предрасположенность к последующим осложнениям и репродуктивным потерям, таким как воспалительное заболевание органов малого таза (ВЗОМТ), внематочная беременность и трубно-перитонеальное бесплодие [3–5]. Оценка риска отсроченных осложнений затруднена в связи с индивидуальными различиями в восприимчивости к инфекции [6]. Кроме того, определенное значение имеют бактериальные факторы (например, вирулентность возбудителя, бактериальная нагрузка), коинфекция или характер микробиоты, а также иммуногенетические различия иммунного ответа хозяина. Дополнительные знания о причинных факторах  развития патологии маточных труб и роли различных иммунологических ответов могут привести к идентификации биомаркеров, полезных для диагностики.
Цель исследования – оценка роли инфекций, передаваемых половым путем, с помощью изучения ДНК ИППП методом ПЦР-диагностики в перитонеальной жидкости и маточных трубах и уровня иммуноглобулинов (IgG к MOMP и IgG к HSP60) к C. trachomatis у пациенток с бесплодием.

Материалы и методы
Обследованы 93 пациентки в возрасте от 19 до 40 лет, поступившие в гинекологическое отделение для проведения лапароскопии по поводу бесплодия. 
Основную группу составили 57 женщин с предполагаемым трубно-перитонеальным фактором бесплодия (1-я группа). В анамнезе у всех пациенток 1-й группы были указания на перенесенную хламидийную инфекцию. После проведения лапароскопии 1-я группа была разделена на 2 клинические подгруппы с учетом результатов хирургического вмешательства. 1А подгруппу составили 32 женщины с патологией маточных труб и спаечным процессом, приведшим к непроходимости маточных труб. 1В подгруппа включала 25 женщин с фиксированной при гидротубации проходимостью маточных труб после проведения реконструктивно-пластической операции. Группу контроля составили практически здоровые женщины, направленные на диагностическую лапароскопию  в качестве подготовки к экстракорпоральному оплодотворению в связи с бесплодием неуточненного генеза (35 женщин). 
Материалом для исследования в вышеуказанных группах послужили интраоперационно полученные образцы из брюшной полости (перитонеальная жидкость, аспираты содержимого маточных труб) и образцы венозной крови. Для диагностики ДНК возбудителей ИППП использовали прямые методы (ПЦР). Выполнялась детекция ДНК С. trachomatis, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum + parvum, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae в аспиратах маточных труб и перитонеальной жидкости. Применяли наборы реагентов «НПФ ДНК-Технология» (Москва). Определение IgG к MOMP и IgG к HSP60 C. trachomatis производили по стандартной методике, описанной в протоколе ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск). Статистическую обработку полученных данных с применением χ2 и критерия Фишера осуществляли с помощью пакета прикладных программ Statisticа 12.5. 

Результаты

Медиана возраста пациенток 1-й группы составила 
30 [26,5; 35,0] лет. В группе контроля медиана возраста обследуемых пациенток составила 27 [25,0; 29,5] лет. При оценке между исследуемыми группами достоверных статистических различий не обнаружено (р>0,05).
До проведения оперативного вмешательства на этапе амбулаторного обследования проводилось ПЦР-исследование на наличие ИППП в нижних отделах генитального тракта. Обязательным условием госпитализации были отрицательные результаты ПЦР-диагностики, свидетельствующие об отсутствии патогенов на уровне нижнего отдела урогенитального тракта. 
В 1-й группе (n=57) исследуемых пациенток с перенесенной ранее хламидийной инфекцией уровни IgG к HSP60 и IgG к MOMP C. trachomatis превышали показатели группы контроля (р<0,05). У женщин 1А подгруппы (n=32) с трубно-перитонеальным бесплодием в сочетании с непроходимостью маточных труб IgG к HSP60 C. trachomatis были выявлены у 23 (71,9%), IgG к MOMP C. trachomatis – у 29 (90,6%) пациенток соответственно. В подгруппе 1В (n=25) у женщин с бесплодием, перенесших хламидийную инфекцию, и проходимыми маточными трубами IgG к HSP60 C. trachomatis были обнаружены у 10 (40%), IgG к MOMP C. trachomatis у 24 (96%) обследуемых женщин. В группе контроля у 2 (5,6%) из 36 пациенток были обнаружены IgG к MOMP C. trachomatis при отсутствии IgG к MOMP C. trachomatis и IgG к HSP60 C. trachomatis. 
Анализ определения ДНК возбудителей ИППП в верхнем отделе генитального тракта в 1-й и 2-й группах показал отрицательный результат для всех возбудителей. В дальнейшем для решения практических и теоретических задач нами был проведен анализ «Деревья решений» (рис. 1) для нахождения правил классификации по всем парам подгрупп (1А-2; 1В-2 и 1А-1В). 
Выделяем решающее правило для 1А подгруппы:
IgG_MOMP=1 и IgG HSP60=1.
Выделяем решающее правило для 2-й группы:
Если IgG_MOMP=0.
Выделяем решающее правило для 1В подгруппы: 
Если IgG_MOMP=1 и IgG HSP60=0.
На основе этих правил из входного потока пациентов можно выделить подгруппу 1А с чувствительностью (Se) 98% и специфичностью (Sp) 91% (рис. 2), и группу 1В с чувствительностью (Se) 75% и специфичностью (Sp) 92% (рис. 3).
 При сравнении основной группы с группой контроля были получены статистически значимые отличия по всем антителам. Однако, несмотря на статистически значимые различия между подгруппами по уровню антител в сыворотке крови, мы не можем со 100% уверенностью прогнозировать наличие патологии маточных труб. И все-таки, чем выше уровень антител, тем больше вероятность необратимого поражения маточных труб, что показывают выявленные нами различия между подгруппами в 1-й группе с перенесенной хламидийной инфекцией, но с визуальным поражением маточных труб или без такового. 

Обсуждение
Генитальная инфекция, вызванная грамотрицательной облигатной внутриклеточной бактерией C. trachomatis, является наиболее распространенным заболеванием, передаваемым половым путем [7, 8]. 
В принципе любой сексуально активный человек подвержен риску заражения хламидийной инфекцией, однако две трети новых случаев инфицирования происходит среди молодых, наиболее сексуально активных женщин в возрасте от 15 до 24 лет [9]. C. trachomatis ассоциируется с неблагоприятными патологиями у женщин, такими как ВЗОМТ и сальпингит, ведущими в итоге к бесплодию трубного генеза [10, 11]. В ряде исследований было показано, что  IgG к HSP60 и IgG к MOMP C. trachomatis могут быть ассоциированы с восходящей генитальной инфекцией [12–15]. 
 Задачей данного исследования был анализ содержания антихламидийных антител в сыворотке крови и результатов ПЦР-диагностики ДНК ИППП в перитонеальной жидкости и содержимом маточных труб. Результаты показали, что уровни IgG к HSP60 и IgG к MOMP C. trachomatis выше у женщин c перенесенной хламидийной инфекцией, однако при необратимых повреждениях маточных труб по сравнению с инфицированными ранее хламидийной инфекцией женщинами с проходимыми маточными трубами мы выявили более выраженное повышение IgG к HSP60. Таким образом, результаты проведенного исследования могут служить значимым прогностическим маркером для верификации необратимой патологии маточных труб. Однако для получения окончательных выводов необходимо большее количество исследований.



Заключение 
Результаты настоящего исследования подтвердили общепринятую гипотезу о том, что тяжелая или рецидивирующая хламидийная инфекция может привести к трубному бесплодию. Кроме того, настоящее исследование продемонстрировало повышенный ответ антител у пациенток с перенесенной хламидийной инфекцией и необратимыми повреждениями маточных труб в сравнении с серопозитивными женщинами с проходимыми маточными трубами. Связь между бесплодием трубного генеза и сывороточными антителами, продемонстрированная в настоящем исследовании, делает измерение уровней IgG к MOMP и HSP60 С. trachomatis потенциальным предиктором прогнозирования осложнений после перенесенной хламидийной инфекции. Тем не менее IgG к HSP60 С. trachomatis представляются наиболее перспективными в качестве прогностического маркера для определения степени поражения маточных труб. 

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interests. The authors declare that there is not conflict of interests.


Дубровина Светлана Олеговна – д-р мед. наук, проф., гл. науч. сотр., ФГБОУ ВО РостГМУ. E-mail: s.dubrovina@gmail.com;ORCID: 0000-0003-2424- 2672
Svetlana O. Dubrovina – D. Sci. (Med.), Prof., Rostov State Medical University. E-mail: s.dubrovina@gmail.com;
ORCID: 0000-0003-2424-2672
Ардинцева Оксана Александровна – аспирант, врач акушер-гинеколог, ФГБОУ ВО РостГМУ. E-mail: ardintsevadoc@yandex.ru;
ORCID: 0000-0001-6084-3569
Oksana A. Ardintseva – Postgraduate Student, Rostov State Medical University. E-mail: ardintsevadoc@yandex.ru;
ORCID: 0000-0001-6084-3569
Статья поступила в редакцию / The article received: 10.08.2021
Статья принята к печати / The article approved for publication: 19.08.2021